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研究动态
CST 9812,KinomeView®Profiling kit快速筛选多条信号通
发布时间:2019-12-25 14:15 来源:未知

CST 9812,KinomeView®Profiling kit,可快速筛选多条信号通路的神器

市场部 友谊中联 
2018-11-07

KinomeView® Profiling是一种基于蛋白免疫印迹(WB)实验的预筛选工具。小试剂盒大能量,一盒含16支一抗和2支二抗,该试剂盒实验方法与常规WB一致,而抗体与常规WB位点特异性不同。通过使用特定的基序抗体,KinomeView® Profiling 在激酶组学水平上对胞内磷酸化进行分析。

通过KinomeView®分析,我们可以:

1)观察到不同样本中哪些信号通路发生了变化;

2)确定哪些磷酸化Motif抗体可以检测到研究中处理前后的磷酸化修饰变化情况,以用于后续的质谱分析;

3)优化实验条件,如需要选择哪些合适的实验样本、处理的剂量和时间等。

试剂盒组分:


 

CST已研发出18种磷酸化Motif抗体,除去9812试剂盒中的,还有14-3-3 Binding Motif(cat:9601,9606)、PKD Substrate(cat:4381)等抗体。

可检测已知和未知激酶介导的丝氨酸(Ser,S),苏氨酸(Thr,T),酪氨酸(Tyr,Y)磷酸化。这些抗体可以用于KinomeView®免疫印迹及后续的PhosphoScan®质谱研究。

既然KinomeView® Profiling试剂盒中的基序抗体都是针对激酶的底物而设计的,我们先简单的科普下什么是蛋白激酶?

蛋白激酶是调节细胞功能的关键因素,他们构成了一个最大和功能多样的基因家族。通过添加磷酸基团到底物蛋白上,他们直接活化、定位蛋白并影响其功能,协调几乎所有细胞过程。激酶对信号转导的作用尤为突出,他们还能协调复杂的细胞功能,如细胞周期。激酶介导的功能多样性显示大约有50个不同的激酶家族,这些激酶家族在酵母、无脊椎动物和哺乳动物种属间是保守的。在518个人类的蛋白激酶中,478个激酶属于催化区域的序列有相关性的高级家族,这些激酶可以聚集成组、家族和亚家族,从而增加序列的相似性和生化功能的一致性。激酶系统树图(图1)显示这些催化域之间的序列相似性:树枝上激酶之间的距离与其序列的差异成正比。七个主要激酶家族被标记成不同的颜色例如,酪氨酸激酶家族形成了一个不同的组,其成员的磷酸化发生在酪氨酸残基上,而其他激酶家族的成员主要使丝氨酸和苏氨酸残基发生磷酸化。激酶系统树图在某些情况下可用来预测超过100个未知功能的激酶底物及其生物功能。另外40个非典型激酶与典型激酶没有序列相似性,但他们已知或预测具有酶活性,还有一些非典型激酶预测有与典型的激酶类似的折叠结构。

通过KinomeView®分析,我们可以观察到不同样本中信号通路相关的关键分子发生了变化,进而推断出相关信号通路的变化。不仅如此,对于疾病样本中筛选药物的作用机制也提供了强有力的工具。如,在药物处理和未处理组直接进行比较,看有用的药物到底涉及哪种激酶的磷酸化,那么药物相关分子机制便能进一步深入地阐述清楚。

产品信息: